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前列腺特異性膜抗原啟動子增強子調控重組質粒的構建及鑒定

【?2006-01-17 發布?】 臨床報道  

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       (成都)為了探討前列腺特異性膜抗原(PSMA)啟動子和增強子調控目的基因表達的前列腺細胞特異性,了解增強子增強轉錄效率的能力。研究者采用PCR方法從前列腺癌細胞DNA中分別擴增PSMA啟動子和增強子序列,先后克隆到含有報告基因綠色熒光蛋白(GFP)的質粒載體,脂質體介導基因轉染不同癌細胞并觀察GFP在不同細胞的表達情況。結果成功構建質粒pEGFP-PS-MAPro和pEGFP-PSMAEP,轉染結果顯示PSMA表達陽性的LNCaP細胞中存在GFP的有效表達,且pEGFP-PSMAEP的調控轉錄能力較pEGFP-PSMAPro強20倍??梢奝SMA啟動子增強子調控GFP表達的重組質粒的構建證明該調控序列具有前列腺細胞特異性,增強子能夠明顯增強啟動子的轉錄效率,增加了目的基因的表達水平。PSMA啟動子和增強子的共調控可以保證基因表達的強度和細胞特異性,為前列腺癌基因靶向性治療研究提供實驗依據。 
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